北京中惠普浅析液相色谱仪检定中的问题及建议

北京中惠普分析技术研究所浅析 讨论了液相色谱仪检定过程中输液系统、进样系统、检测系统检定结果的影响因素，提出控 制和改进方法；提出了增加进样系统相应项目的评价方法，为提高液相色谱仪的检定结果的科学性、 有效性提供参考。液相色谱仪具有快速、灵敏、高选择、高分离效率及适用范围广等特点，广泛应用于食品药品的定性与定量检测等领域，是分析实验室必备的理化分析测试仪器。

北京中惠普SPN-500氮气发生器

随着液相色谱技术的不断发展，仪器的更新换代，液相色谱仪第一版检定规程自 1991年 01 月 01 日发布实施已经经过两轮修订，能够较好与仪器的发展水平相适应。但是，由于仪器应用面较广，各行业对仪器的性能要求的侧重也不同，根据检定实践积累，对规程中泵流量测定、波长示值误差与重复性、线性范围等内容提出方法改进和优化的建议，为规程的修订提供参考。
输液系统泵流量实测值的影响因素及其控制
泵流量决定了样品的出峰时间，其设定值误差与稳定性直接影响到样品的定性结果，是仪器检定过程的一个重要环节。
泵流量实测值的影响因素
根据规程，在流动相出口处用事先称重过的洁净容量瓶收集流动相，该出口通常指的是废液端流出口。此时，流动相已经流经整个系统，这不仅是对泵流量的测定，更是对整机流量的测定。其设定值误差与稳定性不仅取决于泵，还会受到其他因素的影响：
1）在常规检定过程中，通常柱温箱为室温状态，但是当检测器为示差折光率检测器时，其柱温须与检测器温度保持一致，为排除室温波动的干扰，通常设定值为 35 ℃及以上。此时，以甲醇作为流动相，当甲醇以较高温度的状态流经整个系统后，其挥发速度明显高于室温状态，使得泵流量设定值小于实际值，温度越高，偏离越大。
2）蒸发光检测器是通过洗脱液雾化成气溶胶在漂移管中蒸发，检测蒸汽中样品颗粒的散射光产生的电信号，从而进行数据采集。根据其原理可知，当流动相流经蒸发光检测器后，会产生一定的损耗，并且其废液流出口的管路过粗，可能有部分雾化，呈气雾状，导致从废液端进行流动相收集的结果不准确。在以上情况下，可从检测器入口处采集流动相。但是部分超高效液相色谱仪，其管路粒径小，压力大，流动相会以喷射状流出，若难以准确进行流动相采集，可更换粗粒径管路后进行测量。
3）实验室条件也会对测量结果产生影响，例如部分生产车间不具备最小分度值在 1 mg 内的天平，或天平不在同层或同楼，或其提供的天平不具有溯源性，均导致测量结果出现偏差。
根据检定经验和试验数据，针对液相色谱仪检定涉及的泵流量测定、波长示值误差与重复性、线性范围等的方法进行探讨。对泵流量测定提出可以增加液相流量计法，提高工作效率。对波长示值误差与重复性提出咖啡因进样方式，避免仪器污染。对线性范围测定，以实验数据证明对于温度、压力、流动相组成的变化敏感的示差折光率检测器而言，自动进样器进样方式更具有可操作性。同时结合液相色谱仪工作实际，提出可以增加样品交叉污染、样品室温度性能的检定，为更加完整地评价仪器性能提供参考。