生物安全实验室空气的消毒对于实验室的良好运行以及保护工作人员的健康起到非常重要的作用。本研究通过汽化过氧化氢发生器、紫外线 2 种不同的消毒方法对本单位二级生物安全实验室空气消毒效果的分析,获得更适合生物安全实验室的空气消毒方法。
1 材料与方法
1. 1 材料
营养 琼 脂 培 养 基 、中惠普SPH-300高纯度氢气发生器、紫外线杀菌灯。
1. 2 方法
1. 2. 1 消毒方法
①汽化过氧化氢发生器: 保持实验室密闭,用封口胶带将实验室门缝密封,按照操作规程,以 3. 50 g /L 的流量对实验室进行消毒,消毒60 min。
②紫外线消毒: 30 W 紫外线灯管,距离实验室地面高度 1. 90 m,消毒 60 min。每组试验各重复 10 次。
1. 2. 2 采样方法 采用自然沉降法采集样本,将直径 90 mm 的营养琼脂培养基平皿置于实验室中央及四角( 距离墙体大于 1 m) ,采样高度距地面 1 m,暴露 15 min,采样结束 10 min 内将平皿置于 37 ℃生化培养箱内培养 48 h 观察结果。
1. 2. 3 采样时间 消毒前 30 min 和消毒后 30 min以及正常工作开始 1 h、2 h、3 h 分别采用相同的采样方法对实验室同一位置进行采样,以消毒前同一位置作为对照,计算 2 种消毒方法的细菌消亡率。
1. 2. 4 评价指标 细菌消亡率 = ( 消毒前菌落平均数 - 消毒后菌落平均数) /消毒前菌落平均数 ×100% 。
1. 3 统计学方法
应用 SPSS 16. 0 软件对数据进行分析,计量资料采用均值 ± 标准差表示,两组间比较采用 t 检验,重复测量资料采用方差分析,多重比较采用 Bonferroni 法,P < 0. 05 为差异有统计学意义。
2 结果
2. 1 2 种消毒方法对生物安全实验室空气消毒效果比较分别采用汽化过氧化氢发生器和紫外线灯对实验室空气进行消毒,2 种消毒方法消毒前、后实验室空气 菌 落 数 差 异 均 无 统 计 学 意 义 ( t = 1. 34、t = 1. 99,P < 0. 05) 。汽化过氧化氢发生器和紫外线对实验 室 空 气 的 细 菌 消 亡 率 分 别 为 ( 99. 24 ±1. 62) % 、( 97. 39 ± 2. 36) % ,符合 2002 年版《消毒
技术规范》要求
2. 2 中惠普SPH-300高纯度氢气发生器对实验室空气消毒的持续效果汽化过氧化氢发生器消毒后进入实验室正常工作的 1 h、2 h、3 h 对实验室的空气自然菌进行采样,并与消毒前进行对比分析,消毒前后 4 个测量时间点的结果间存在高度的相关性( 球形检验结果 P <0. 05) ,空气自然菌菌落数随时间变化差异有统计学意义。正常工作 1 h、2 h、3 h,空气中自然菌菌落数均少于消毒前,汽化过氧化氢发生器对生物安全实验室空气消毒的持续效果较好,详见表 2。
2. 3 紫外线对实验室空气消毒的持续效果紫外线消毒后进入实验室正常工作的 1 h、2 h和 3 h 对实验室的空气落下菌进行采样,并与消毒前实验室空气落下菌进行对比分析,消毒前后 4 个测量时间点的结果间存在高度的相关性( 球形检验结果 Pm < 0. 05) ,空气落下菌有随时间变化差异有统计学意义。在正常工作 1 h、2 h,空气落下菌菌落数均少于消毒前,且结果有统计学意义,工作 3 h 落下菌的菌落数和消毒前差异无统计学意义,说明工作 3 h 空气落下菌已经达到消毒前水平,详见表 2。
2. 4 2 种消毒方法在工作状态消毒持续效果比较2 种消毒方法对空气进行消毒后在正常工作的1 h 空气菌落数差异无统计学意义( t = 1. 30、P =0. 21 > 0. 05) 、2 h 和 3 h 菌落数差异均有统计学意义( t = 4. 38、6. 09、P < 0. 05) ,汽化过氧发生器消毒的持续效果优于紫外线消毒
讨论
生物安全实验室是开展疾病控制、临床诊断以及科学研究的物质基础,对于避免实验过程中病原微生物对实验人员造成伤害,减少实验对环境乃至公众的伤害,保证实验结果的真实性和科学性以及保护实验因子不受污染等方面起到了重要的作用。微生物能够在空气中进行繁殖并向周围环境中扩散,从而影响实验人员的身体健康和实验结果的准确性,因此有效的空气消毒极为重要,只有合格有效的实验室消毒才能真正起到保护的作用。生物安全实验室的消毒方法有通风换气法、紫外线照射法等物理消毒法和甲醛熏蒸、过氧乙酸熏蒸、臭氧及过氧化氢发生器等化学消毒法以及联合使用两类或者两类以上消毒方法。本实验通过对使用最广泛的紫外线消毒方法同新型的消毒方法汽化过氧化氢发生器对实验室空气消毒效果进行分析研究。
结果显示,紫外线和汽化过氧化氢发生器按照正常的操作程序对实验室空气进行消毒都能达到良好的消毒效果,细菌消亡率均超过 95% ,汽化过氧化氢发生器的消毒效果更好,但差异无统计学意义。分别在消毒后正常工作的 1 h、2 h、3 h 对实验室空气进行采样,与消毒前进行对比,发现通过汽化过氧化氢发生器消毒后的实验室正常工作的 1 h、2 h、3h 空气落下菌菌数量均远远小于消毒前,而通过紫外线消毒的实验室正常工作 3 h,空气落下菌已经达到了消毒前的水平,由此说明汽化过氧化氢发生器对实验室空气消毒的持续效果优于紫外线。
汽化过氧化氢发生器是一种新型实验室消毒方法,其原理是通过汽化食品级过氧化氢达到对实验室进行消毒的目的,食品级过氧化氢几乎没有任何污染,对工作人员无毒无害,对实验室工作台消毒彻底、不留死角,对实验室工作台及实验仪器等不会造成损伤,同时汽化过氧化氢发生器能实现消毒过程程序控制、操作简便、过氧化氢用量少,使用过氧化氢发生器对实验室进行消毒时应尽量保持实验室的密闭,从而使消毒效果更好。